2017年10月27日上午10:30-11:30,生命科学学院研究生分会于成龙校区第三实验大楼西206举办了主题为“流式细胞仪的原理与应用”的讲座。讲解人员为beckman公司的老师,参加此次讲座的人员为我院全体研究生。此次讲座促进了学术的交流,营造了学术争鸣的氛围。
下面主要针对流式原理、流式应用、细胞凋亡检测与分析进行介绍。它的原理为活细胞表面保留有较完整的抗原或受体,先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合,再用荧光标记的第二抗体结合,根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。应用包括了分析细胞表面标志;分析细胞内抗原物质;分析细胞受体;分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量;分析免疫细胞的功能。对于细胞凋亡的检测与分析,其原理为细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V是一种Ca+依赖的磷脂结合蛋白,最初发现是一种具有很强的抗凝血特性的血管蛋白,Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性。对PS有高度的亲和性。因此,该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此,可以建立一种用Annexin V结合在细胞膜表面作为凋亡的指示并结合一种染料排除试验以检测细胞膜的完整性的检测方法。
在此次讲座中,学生与老师一起交流探讨,促进了大家的相互交流与学习,营造了浓厚的学术氛围。在一片紧张而又和谐的氛围中,此次报告取得了圆满成功。
生命科学学院研究生分会 宣传部